孤独症（autism），又称自闭症或孤独性障碍，目前尚无有效的药物治疗，另类疗法效果参差不齐，且缺乏循证医学证据。曾有研究显示，某些染色体异常与孤独症有关，因此，科学家们试图将目前基因编辑技术用于孤独症治疗，近日著名学术期刊《Nature Biomedical Engineering》上发表的一篇论文证明该设想或可成真。
美国加利福尼亚大学伯克利分校的研究人员采用金纳米粒子将可切割DNA的Cas9酶输送到大脑，助其编辑神经递质受体基因，成功减少了脆性X综合症（FXS，孤独症谱系障碍（ASD）最常见的单基因综合征）的夸张重复性行为。他们将该金纳米粒子称为CRISPR-Gold，相关结果以《Nanoparticle delivery of CRISPR into the brain rescues a mouse model of fragile X syndrome from exaggerated repetitive behaviours》为题发表。
在FXS小鼠实验中，研究人员利用CRISPR-Gold将Cas9蛋白注入脑部纹状体。CRISPR-Gold作为CRISPR递送系统，与Cas9形成复合物，纹状体是已知可调节习惯形成的区域，其包含与ASD常见重复行为有关的区域。入脑后的CRISPR-Gold-Cas9复合物可靶向参与神经元间的通信并在FXS中失调的重要兴奋受体-代谢型谷氨酸受体 5（mGluR5），抑制mGluR5基因表达，从而使神经元细胞夸大信号的产生受制，减少重复性行为。
在FXS的老鼠中，重复行为包括迷恋挖掘和周期性跳跃。CRISPR-Gold处理后，实验鼠的挖掘行为减少了30％，而跳跃减少了70％。而处理后的实验鼠的大脑基因检测结果发现，其纹状体中约50％的mGluR5基因被Cas9复合物编辑，使受体蛋白质的数量减少了近一半。这就说明CRISPR-Gold技术可有效治疗小鼠ASD相关的重复行为。
研究人员将CRISPR-Gold-Cas9复合物分次局部注射入小鼠大脑，发现其可作用于大脑中的不同神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞，这说明CRISPR-Gold-Cas9复合物具有广泛的细胞取向性，可在大脑中编辑多种细胞类型。由于CRISPR-Gold的GNP核心可能在多次注射后在脑内累积，这可能会影响CRISPR-Gold-Cas9复合物多次注射后的效果。
但是，CRISPR-Gold-Cas9复合物的单次极低剂量的注射确实可有效挽救了小鼠的行为缺陷，更惊喜的是，研究人员发现其似乎在大脑中具有良好的耐受性。
研究人员表示，CRISPR-Gold与其他协助Cas9进入人体的方式（如病毒）相比具有多重优势。他们发现，只要CRISPR-Gold-Cas9复合物注入大脑，就可以成功敲除致病基因，同时获得有益治疗的行为变化，这是Cas9第一次以非病毒传播的方式入脑获得的巨大成功。
曾有其他研究者利用病毒将Cas9基因插入神经元，这种方法引发了Cas9酶持续表达，导致其他基因被误切多切，因此该方法被舍弃。而CRISPR-Gold是携带纯化Cas9蛋白的非病毒复合物，可直接导入细胞中，其分裂几次后便会消失，开辟了CRISPR入脑的新的有效途径，并使CRISPR的副作用最小化。
总而言之，CRISPR新技术的创新让孤独症的有效治疗不再是奢望。夸张重复行为是孤独症谱系障碍的共同特征，FXS小鼠模型中这些行为的有效减少表明该技术可能应用于其他已知遗传病因的孤独症患者。
相对于过往失败的研究，这是第一次成功编辑大脑中的孤独症相关基因，同时成功治疗了相关症状。另外，该技术为治疗阿片成瘾和神经性疼痛，精神分裂症和癫痫发作等疾病开辟了新道路。
参考文献：
1. CRISPR editing reduces repetitive behavior in mice with a form of autism
2. Nanoparticle delivery of CRISPR into the brain rescues a mouse model of fragile X syndrome from exaggerated repetitive behaviours
微信客服
微信公众号
